心肌梗死也算是作为21世纪医学亟待解决的难题之一,能引起急性、持续性缺血、缺氧的心肌坏死,毕竟导致心肌的缺血性坏死,严重的可能会危及生命。一直以来,心肌梗死备受广阔医疗科研人员的重视,近年来我国心肌梗死的发病率更是呈明显上升趋势。但由于心肌梗死的许多病理生理材料难以从临床研讨中获得,其防治上的进展有赖于基础研讨上的突破。建立心肌梗死动物模型尤为重要,它关于研讨人类心肌梗死的病理生理变化、心电生理改动以及点评各种医治方法具有重大价值。下面我们就以大鼠为例,为大家介绍心肌梗死动物模型的几种造模方法。
结扎法
造模方法:
以体重250g左右,成年Wistar大鼠为例,39/L戊巴比妥钠10ml/kg进行腹腔打针,插管前给予阿托品20~30μg/kg腹腔打针。先行气管插管,联接呼吸机;
大鼠仰卧位四肢固定好,去毛,上界为胸骨上缘水平,下界为胸骨下缘水平。消毒铺单后,以心尖搏动最 强点为中心,沿胸骨左缘3mm左右作一约1.5~2.0cm长纵形堵截,逐层开胸进入胸腔。
剪开心包膜,显露左心耳,从左心耳下方2~3mm入针,结扎的中点在左心耳和肺动脉圆锥的交界上。结扎方向与左心耳边际平行,并且与房室交界限垂直。
进针深度1.5~2.0mm,由于大鼠冠状动脉细小不易于心肌分别,通常用缝合线连同部分心肌一同结扎,结扎的力度适中以防止危害心肌或血管。把心脏放回胸腔,敏捷缝合胸壁。间断人工呼吸。 造模成功的标志是心壁的颜色变白和心电图监测ST段举高。
造模机制:
通过结扎引起心肌梗死动物模型的冠状动脉狭隘或阻塞,使该冠脉所供给的心肌缺血、坏死,从而引起模型动物心肌梗死。
优点:
结扎法制作心梗动物模型的规划较为清楚、效果切当,造模自由度高,可通过心电图、病理学、血清酶学等对造模进程进行实时监控和评估。
缺点:
需进行开胸操作,进程凌乱,对外科技术和设备要求高,不适用于一般实验室造模研讨。动物伤口大,死亡率高。
电炙烤冠状动脉、冰冻法
造模方法:
以大鼠为例,选取体重250g左右Wistar大鼠,3g/L戊巴比妥钠10ml/kg进行腹腔打针,插管前给予阿托品20~30μg/kg腹腔打针。先行气管插管,联接呼吸机;
大鼠仰卧位四肢固定好,去毛,消毒铺单。以心尖搏动最 强点为中心,沿胸骨左缘3mm左右作一约1.5~2.0cm长纵形堵截,逐层开胸进入胸腔。如选择电炙烤法,把小高频刀的电灼电极置于左冠状动脉前降支深部,电凝1~2秒;
选择冷冻法,将已在液氮中预冷的圆柱型钢钉(冷冻头直径0.6cm)敏捷置于大鼠左冠状动脉,前降支中上1/3所分配的心肌区域,冷冻10秒。查询ECG动态变化,在两个以上肢体导联出现ST段上抬(0.2mV以上)并伴对应导联改动,肉眼观危害区域变灰白,可初步判断手术成功。关闭胸腔,撤出呼吸机,按需求处理动物。
造模机制:
同归于开胸法造模,电炙烤冠状动脉与结扎法不同的是通过电凝作用使冠状动脉阻塞,也通过电流使部分心肌组织坏死,引起心肌梗死;而冰冻法则是直接危害相应心肌,引起心肌梗死动物模型中模型动物心肌梗死发生。
优点:操作更加简略,定位较为准 确,能更好的查询到心肌组织完好的凝固性坏死进程及肉芽和瘢痕组织构成。
缺点:电影响简单引起心律失常,动物死亡率高,两种方法造模与临床心梗患者的发病机制不同大,生理、生化目标也很不相同。
线栓法
造模方法:
雄性Wistar大鼠,体重300~400g。导线:直径0.36mm,实验中可重复使用,为便于操作,可将导线缩短为30cm。灌注导管缩短为20cm,作为心导管引起心肌梗死。
动物按50mg/kg的剂量经腹腔打针3%戊巴比妥******************。插管前给予防备剂量的利多卡因(2mg/kg,ip)和肝素(200U/kg,sc),以减小室颤和血栓的构成。动物仰卧固定,颈部正中堵截。分别右侧颈总动脉,结扎远端。
A24号皮下打针针,穿刺入颈总动脉,成功的穿刺标准是:动脉血从内部的针中流出,当内部的针移开后,外层的套管可以渐渐地进入颈动脉。显露的颈动脉用丝线结扎套管,防止血液流出。
心导管(带有j形尖 端)通过套管在荧光指引下经升主动脉进入左冠状动脉,导线轻轻的附在左冠状动脉的根部,导线逆时针旋转进入左冠状动脉(LCA)。导线在右冠状动脉根部顺时针旋转,进入右冠状动脉(RCA)。
一旦导线进入冠状动脉,导线渐渐前进,直到动物心电图表现为ST段升高。本实验的动物体重较大,使冠状动脉的粗细和导线的外径相当。因而导线进入冠状动脉几个毫米就可以阻断下游的血液供给,构成透壁心肌缺血。导线在冠脉阻断60s后移走。
实验最 后,外套管取下,颈动脉伤口关闭后,缝合皮肤堵截。时间短的心肌缺血在右和左冠脉均出现。当导线进入LCA后,ST段在V1~V6均明显上升,标明左室为透壁性心肌缺血。进入RCA后在Ⅱ、Ⅱ、aVf、V1和V2出现 S—T段举高。
造模机制:通过灌注导线,作为心导管引起心肌梗死。
优点:在很大程度上减小了手术并发症比方气胸,感染;动物的死亡率较小,对血管的危害较小,可以模拟人重复多次构成心肌缺血后又恢复的进程。
缺点:难度较开胸法明显加大,实验设备要求高。
综合以上的分析,就是我们为大家总结的几种心肌梗死动物模型用到的方法,主要是有结扎法、线栓法以及选择冷冻法,也是说到了各自的优缺点。其中,选择冷冻法,将已在液氮中预冷的圆柱型钢钉(冷冻头直径0.6cm)敏捷置于大鼠左冠状动脉,前降支中上1/3所分配的心肌区域,冷冻10秒。查询ECG动态变化,在两个以上肢体导联出现ST段上抬(0.2mV以上)并伴对应导联改动,肉眼观危害区域变灰白,可初步判断手术成功。关闭胸腔,撤出呼吸机,按需求处理动物。