来源：《常见和新发传染病动物模型》

      由于手足口病的流行地区主要为亚太地区的不发达国家，而发达国家对此病的研究很少，长期以来对手足口病和其病原体的认识程度不够，所以动物模型的研究工作也相对滞后。近10年，对动物模型的研究有较大的进展。
      动物并非EV71的天然宿主，这为动物模型的建立带来了一定的困难。因此，EV71的临床分离株需要在动物体内进行适应性培养，建立适应株方能成功地感染小鼠，并引发临床症状。
      1.临床分离株在动物体内的适应  EV71感染的1日龄的新生ICR或BALB/c小鼠是最为常见的EV71模型动物。临床分离毒株对小鼠肌组织的嗜性高于脑组织，经过小鼠体内扶强后的临床分离株，可以引发神经症状，甚至可以感染1周龄或两周龄的ICR小鼠。
      EV71的临床分离株分别在中国仓鼠卵巢细胞和BALB/c乳鼠颅内扶强，得到的适应株对BALB/c幼鼠毒性均比亲本毒株明显提高。深入研究适应株毒性提升的分子机制发现，在仓鼠细胞系扶强的毒株(CHO-26M)中VP2蛋白一个氨基酸位点突变(Lys149→Ile)。而小鼠适应株(MP-26M)的两个氨基酸发生变异，分别位于VP1蛋白(Gly145→Glu)和2C蛋白(Lys216→Arg)中，随后的试验证实，单独VP1蛋白的突变(Gly145→Glu)即可提高毒株对小鼠的感染力。将EV71的临床分离株在ICR乳鼠颅内扶强，得到了一株毒力显著增强的适应株——MP4，序列分析发现，MP4毒株与亲本毒株相比，5'非翻译区，VP2和2C蛋白的编码基因均有核苷酸变异，这些变异导致了VP2和2C蛋白分别发生了1个和4个氨基酸的变异。然而，氨基酸的突变与小鼠适应株毒力提升之间的关系还有待研究。
      2.小鼠模型  由于EV71主要感染6周岁以下的婴幼儿，该病毒的模型主要使用新生或幼龄的小鼠来建立。表19-1对使用不同基因型的毒株感染小鼠的模型进行了总结。

      使用B1亚型保加利亚临床分离株感染1日龄的新生小鼠，可引发瘫痪、肌炎及肌纤维坏死。将B1亚型的EV71毒株在NOD/SCID小鼠颅内传代扶强，分离到一株NOD/SCID小鼠适应毒株，用这个毒株感染3～4周龄的NOD/SCID小鼠后，可以使小鼠表现出后肢麻痹。
      使用B3亚型的澳大利亚临床分离株在BALB/c小鼠颅内扶强，扶强后的毒株感染1～7日龄BALB/c小鼠后，引发了严重的致死症状，骨骼肌是病毒的主要复制位点，病毒侵染引发严重的坏死性肌炎。
      使用B3和B4亚型的EV71作为出发毒株对小鼠进行颅内病毒感染后，小鼠均出现明显的体重增长减缓，而B3亚型毒株感染2d后可观察到嗜睡和运动不协调等症状，部分小鼠四肢肿胀并死亡，未发现后肢瘫痪症状，而且未死亡的小鼠在感染6d后，上述症状全部消失，恢复正常。
      使用C2亚型的小鼠适应株通过灌胃法感染1日龄的ICR小鼠，2d后，小鼠可出现皮肤病变，在4～7d后出现后肢瘫痪，7～9d后死亡，有脑部的淋巴细胞浸润(图19-1)。

      将上述C2亚型毒株在1日龄的ICR小鼠颅内4次传代扶强后，得到MP4菌株。该扶强菌株在体内外的毒力均比出发菌株增强，且扶强后的毒株可通过灌胃法感染7日龄ICR小鼠，导致其后肢麻痹，并在5～9d死亡(图19-2)。感染早期，可在小鼠的小肠内检测到病毒复制，而病毒的主要复制位点为肌肉，脊髓和脑。病理可观察到感染小鼠的脑干与脊髓中神经元消失和凋亡，四肢肌肉大面积坏死(图19-3)。MP4感染小鼠后，可发生同窝之间的相互感染现象。

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