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动物行为学实验方法与评价

作者: 来源: 日期:2024/1/18 13:20:28 
       动物行为学实验是动物整体生理和心理状态综合、全面和实时效应的反应,被认为是人类疾病表现和发病机制研究,新药发现、安全和风险监测分析的基本实验手段,可以对啮齿类、灵长类、非灵长类及其他动物的学习记忆、焦虑、抑郁、恐惧、运动、疼痛、成瘾、社会交往等8大类行为进行评估,在阿尔茨海默病、帕金森病、抑郁症、焦虑症、疼痛性疾病、成瘾性疾病等精神性疾病的基础研究、新药研发具有很强的操作性和示范作用。
       目前主要的行为学实验包括学习记忆行为实验、抑郁行为实验、焦虑行为实验、恐惧行为实验、自发活动行为实验、节律行为实验、攻击行为实验、防御行为实验、繁殖行为实验、社会行为实验等。研究最多的主要是学习记忆、情绪和运动行为等。


 
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       凯斯艾生物在学习记忆、情绪和运动行为等方面已经具备专业的研究平台,在疼痛,CNS领域,帕金森PD,阿尔兹海默症AD,卒中Stroke等等已开展过多项研究。

学习记忆类

Morris水迷宫:
       Morris水迷宫实验是应用最广泛的研究、用于评价动物空间学习记忆能力的行为学实验,基于动物厌恶水环境的特性,强迫实验动物游泳,学习寻找隐藏在水中的平台(如AD模型等),整个实验包括适应性训练,定位航行和空间探索,要求实验环境安静,实验操作人员及其操作位置固定等,主要记录大小鼠的逃避潜伏期, 运动总路程,穿越平台次数,目标象限时间比等指标,实验中注意水温,平台位置,空间标记物,入水象限,固定时间段检测,操作轻柔避免不必要应激等。


Y迷宫:
       Y迷宫主要应用于动物的辨别性学习,工作记忆及参考记忆的测试,由三个完全相同的臂组成,每个臂尽头有食物提供装置,根据分析动物取食的策略即进入各臂的次数、时间、正确次数、错误次数、路线等参数可以反映出实验动物的空间记忆能力。相对而言,Y迷宫简便、可行,相对八臂迷宫来说更加简单,有一定的实用性,现常用于学习记忆功能评价。迷宫有多种经典的测试方法:食物奖励交替评估空间记忆和自发交替评估空间学习。


新物体识别测试
       新物体识别测试通过实验动物对已熟悉物体与新陌生物体的探索时间长短的行为学方法来评价动物的认知记忆能力。实验设施比较简单,不涉及到声、光、电等外部刺激,是在非动机驱动,完全自由的前提下进行学习记忆能力测试的行为学实验方法。总体实验周期较短,较之Morris水迷宫实验对动物的消耗也更少。该方法不需要学习训练,无需禁食禁水,不用施加惩罚或奖赏刺激,对动物的应激影响较小,与人类的再认记忆检测相似。


运动行为类

转棒
       转棒实验是一种常用的行为学实验,用于评估小鼠的协调运动和平衡能力。实验通过让小鼠站在一个旋转棒上,观察小鼠在不同速度、不同角度和不同时间的旋转棒上的表现,以评估其运动和平衡能力,记录每只动物在轴上保持不落的时间。

Two-way ANOVA: #p<0.05 vs.模型组
脑卒中缺血90分钟模型
动物行为学评分- 圆筒实验:
       圆筒试验主要针对不对称中枢神经系统疾病,如帕金森病、阿尔茨海默病、脑卒中等,研究动物在贴壁站立过程中前肢的对称性和使用率。圆筒的形状能够刺激鼠用前肢垂直探索筒壁,记录鼠后肢站立时前肢最初触及筒壁的次数,并分别记录左、右侧触及和双侧触及的次数。在局灶性脑缺血后,在圆筒实验中前肢的使用情况具有不对称性,且在前肢垂直探索筒壁的过程中,更倾向于使用正常前肢。

情绪类

旷场实验:
       旷场实验是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种常用方法,既可用于观察实验动物的自主运动能力,也可评估动物的焦虑等情绪行为。现己经广泛应用于帕金森病、抑郁症、焦虑症等神经、精神疾病以及中枢药物评筛的研究中,记录水平活动、中央格停留时间、平均速度、轨迹线和总运动距离等,中枢兴奋药物可以明显增加自主的活动而减少探究行为,一定剂量的抗精神病药物可以减少探究行为而不影响自主活动。

神经行为学评分
       平衡木实验是一种常用于评估大鼠和小鼠运动协调性和平衡能力的行为学测试方法。该实验根据动物在狭窄的木条上移动时能否保持平衡,观察前后肢的使用情况和失脚次数,对动物进行评分。评分如下
1、0分:穿过平衡木,不会跌倒
2、1分:穿过平衡木,跌倒机会<50%
3、2分:穿过平衡木,跌到机会>50%
4、3分:能穿过平衡木,但受累的瘫痪侧后肢不能帮助向前移动
5、4分:不能穿过平衡木,但可坐在上面
6、5分:将大鼠放在平衡木上会掉下了

Garcia JH评分
       该方法从大鼠自主运动、体态对称性、前肢伸展功能、攀爬运动、身体双侧触觉、双侧胡须碰触反应等6个方面评估大鼠神经功能损伤的程度。分值为3~18分,数值越大,神经功能损伤越轻,18分为正常。


Garcia JH 大鼠神经功能评分标准表
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