如果细胞是一场盛大游行，流式细胞术就是那个能同时记录每个人身高、衣服颜色、甚至表情的“超级智能摄像机”。
流式细胞术的原理
流式细胞术是一种基于荧光的检测，从单个细胞中同时测定多种指标，例如细胞群计数和蛋白丰度等。它能在细胞通过仪器时，同步分析其物理特性（如大小）和化学特性（如表面及胞内特异性蛋白表达），从而实现对复杂细胞群体的精准解析。
原理：利用激光激发高速匀速运动的，带有各种荧光标记的微粒，并检测微粒由此产生的散射光信号和荧光信号来反应微粒的各个参数，并将特定性状的微粒分选出来， 再进行分析或培养的技术。
图一 流式细胞仪
流式细胞术的特点
研究对象
细胞的群体（比例、平均荧光强度等）。
分析速度快，分选程度高
可达到1*105细胞/秒，纯度可达99%以上。
能够同时检测细胞的多种信息
能够同时检测包括但不限于细胞膜、细胞核、细胞质等信息。
检测流程如下：
注意事项：
流式检测实验中通常需要收集足够数量的、具有完整活性的细胞作为样本进行检测，对于不同类型的样本，均有合适的方式将其处理成适合实验的单细胞悬液；
样品处理后需要细胞计数，以确保细胞质量适于试验；
死活染色的目的是为了排除死细胞干扰；
Fc阻断剂的作用是阻断巨噬细胞等表面存在的特异性Fc受体，减少特异性染色；
对于需要同时检测细胞表面和胞内抗原的实验，在固定/破膜之前进行细胞表面抗原的染色。如果将细胞固定后再进行表面抗原染色，则需要通过实验确定合适的抗体；
荧光素在强光照射下容易猝灭，因此抗体的保存和孵育过程需在避光条件下进行；
若样品制备好后当日无法上机，可以使用4%多聚甲醛固定后，4 ℃置于上样缓冲液中避光暂存；
根据阴性对照的信号来调节仪器各通道的电压，以保证所有样本信号可以完整显示。
流式细胞术的实际应用
名称 | 标志物 |
免疫细胞表型鉴定 | 通过检测免疫细胞群的表面或细胞内标志物，对其进行分析和鉴定。流式细胞术能够精确鉴定和分类免疫细胞群，如NK细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞、B细胞等。 |
细胞活性检测 | 流式细胞术能够定量检测体内和体外培养的活细胞占比。如annexin V+PI是最常用的染色组合。 |
细胞周期检测 | 流式细胞术能够检测细胞增殖，如CCK-8是常用的检测增殖方法。 |
离子通道和细胞功能检测 | 流式细胞术不仅能够检测fluo-3标记的Ca2+等离子，还能够通过检测细胞内关键酶或蛋白鉴定细胞功能。 |
细胞分选 | 流式分选可以快速检测和分选悬浮液中的单个目的细胞。 |
凯斯艾•珂玛麒分子生物学平台拥有先进的技术手段和丰富的项目经验，不仅能够承担日检测量超300的生化检测指标，还能够为客户提供流式分析、qPCR、ELISA、WB、IP/Co-IP等在内的多种分子生物学检测手段。目前，公司已与国内外众多知名药企及科研机构建立了广泛的长期合作，为创新药物的开发提供坚实基石。
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关于凯斯艾生物
凯斯艾生物科技 (苏州) 有限公司及其全资子公司江苏珂玛麒生物技术有限公司、江苏凯灵生物科技有限公司，是专注于为医药研发领域提供临床前药效及成药性评价技术服务的CRO公司。公司在苏州、南通拥有国际AAALAC认证的国际先进水平的实验动物设施，总面积超过40000㎡，可满足各类临床前实验研究需要。公司拥有包括小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、兔子、猫、雪貂、犬、猪、羊和非人类灵长类动物的全品系实验动物平台；拥有400+种动物疾病模型的体内药效学评价体系；提供100+种病原微生物 (细菌、病毒和真菌) 包括人类药物、兽药和宠物药开发研究所必需的BSL2/ABSL2抗感染研发服务平台；拥有病理学、毒理学、药代动力学、细胞和分子生物学以及医学影像学等多个服务平台；已和国内外1000+知名医药企业展开合作并完成200+国内外新药申报项目。
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