凯斯艾生物科技(苏州)有限公司
引言
肝脏作为人体代谢的“核心器官”,其脂质代谢状态直接反映机体健康水平,而TC(总胆固醇)和TG(甘油三酯)正是衡量肝脂质代谢的关键指标,其检测结果的准确性直接影响实验结论的可靠性。无论是新手小白还是资深实验党,掌握一套标准操作规程都能少走弯路、提升效率。
今天就给大家带来肝组织TC/TG生化检测的完整流程,从试剂仪器到实验步骤,建议收藏备用。
主要仪器与试剂
仪器名称
试剂名称
生化分析仪
总胆固醇(TC/CHOL)测定试剂盒(CE-CO-POD酶法)
高通量组织研磨仪
甘油三酯(TG/TRIG)测定试剂盒(甘油磷酸氧化酶法)
高速冷冻离心机
异丙醇
1.根据肝脏数量取干净的2mL EP管和1.5mL EP管,标记后备用。
2.从-80°C取出肝脏样品,置于湿冰上复溶(避免反复冻融),准确称取样品重量(介于50.0-80.0mg),放入2mL EP管。
3.按照肝重(mg):异丙醇体积(uL)=1:20加入相应体积异丙醇。异丙醇的作用是裂解肝细胞,释放出细胞内的TC和TG,确保后续检测的准确性。
4.每管样品加入2颗不锈钢钢珠(直径3mm)后,放入组织研磨仪,1500rpm研磨30s,共研磨两次。
5.研磨结束后,2-8°C静置过夜。目的是让异丙醇充分裂解肝细胞,使TC、TG完全释放到提取液中,减少检测误差。
6.孵育结束后,4°C,6000rpm 离心10min,取上清液加入1.5mL EP管中,500L/管/样。
7.利用生化分析仪检测样品中TC,TG含量。
生化分析仪
注意事项
凯斯艾•珂玛麒分子生物学平台
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