肺纤维化是一种比较严重的间质性肺疾病,其病理特点为肺泡上皮细胞危害和增殖,基底膜剥蚀,肺泡实变和成纤维细胞病灶,临床表现有呼吸困难,咳嗽,呼吸生理机能受限及气体交换障碍等症状,因此建立稳定靠谱的肺纤维华动物模型是探索其发病你机制和开发有用治疗药物的重要保障。接下来,我们主要说到的是关于肺纤维化模型建立的方法以及实验步骤。
肺纤维化模型构建
肝纤维化常用模型有化学毒性试剂诱导法(四氯化碳诱导,硫代乙酰胺诱导),胆管阻塞法(胆管结扎或寄生虫),乙醇诱导法以及免疫法。
化学试剂诱导法
致病机理:
四氯化碳在肝细胞内经CYP2E1代谢发生的自由基可以危害细胞膜,从而损坏肝细胞的结构和功用,形成肝细胞坏死。同时,肝脏内的星型细胞会活化,释放Ⅳ型胶原酶,降解ⅳ型胶原,组成分泌ⅰ型胶原,而引起胶原堆积和肝纤维化。
动物预备:
雄性的BALB / c小鼠10周龄(BALB / C比C57灵敏,造模成功率更高)或SD大鼠(雄性200克左右)等,橄榄油,四氯化碳,打针器,电子天平。
肺纤维化模型的实验步骤:
①制造四氯化碳溶液,四氯化碳与橄榄油依照体积比1:4混匀,备用。
②按小鼠体重0.5μl/ g CCl4(2.5μlCCl4橄榄油溶液)腹腔打针,每周2次,持续6周。空白对照组仅打针橄榄油2.5μl/ g。
③在连续给CCl4 2周后,可随机抽取对照组和造模组小鼠各3只,检测ALT,AST,TBL以及切片等是否造模成功。
若模型成功,即可进行药物点评,持续处理4周后,即可处死小鼠,检测肝纤维化相关的符号,点评药物作用。
综合以上的分析,就是我们对于肺纤维化模型建立步骤的详细分析,主要是说到了建立方法、用到的小动物以及后面的实验步骤。这对于肺纤维化后续药物的研究与治疗也是打下了一个很好的基础。